<div dir="ltr">Hello Mike,<div><br></div><div>I have a feeling this is a bug that has already been reported and fixed.</div><div><br></div><div>If you update your API install (either using CVS if you did it manually, or by re-running INSTALL.pl), you should pick up this fix.</div>
<div><br></div><div>Let me know if you still see the problem - I have tested with the updated code and I don't get the same error.</div><div><br></div><div>Regards</div><div><br></div><div>Will</div></div><div class="gmail_extra">
<br><br><div class="gmail_quote">On 3 March 2014 12:50, MolOncAdmin <span dir="ltr"><<a href="mailto:MolOncAdmin@cruk.manchester.ac.uk" target="_blank">MolOncAdmin@cruk.manchester.ac.uk</a>></span> wrote:<br><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0 0 0 .8ex;border-left:1px #ccc solid;padding-left:1ex">
Dear VEP developers,<br>
<br>
I have difficulties running the VEP version 73 with mouse vcf files with coordinates of assembly 38 (mm10).<br>
During the step "Calculating consequences" it throughs the error: "Can't call method "db" on unblessed reference at /opt/gridware/pkg/apps/ensemblvep/73/linux-x86_64/perl/lib/perl5/Bio/EnsEMBL/Variation/TranscriptVariation.pm line 313."<br>

Although, if I run the same script with vcfs with coordinates of assembly 37 (mm9) it runs fine.<br>
See the script and files below.<br>
<br>
Any help is greatly appreciated.<br>
<br>
Kind regards,<br>
<br>
Mike Gavrielides  |  Bioinformatician, Software developer<br>
Molecular Oncology Group<br>
Cancer Research UK Manchester Institute, The University of Manchester, Wilmslow Road, Manchester, M20 4BX<br>
<br>
<br>
file with coor. assem. 38 '1906.snp.cand.snvs.pass.thresh.vcf.38', (throughs the error):<br>
<br>
##fileformat=VCFv4.1<br>
##INFO=<ID=DB,Number=0,Type=Flag,Description="dbSNP Membership"><br>
##INFO=<ID=H2,Number=0,Type=Flag,Description="Hapmap2 Membership"><br>
##INFO=<ID=H3,Number=0,Type=Flag,Description="Hapmap3 Membership"><br>
##INFO=<ID=RL,Number=1,Type=String,Description="Resource Link"><br>
##INFO=<ID=FBV,Number=1,Type=String,Description="Frequency Based Validation"><br>
##INFO=<ID=GTP,Number=1,Type=String,Description="Genotype"><br>
##INFO=<ID=QC,Number=1,Type=String,Description="Quality Check"><br>
#CHROM POS ID REF ALT QUAL FILTER INFO<br>
1 14231524 . T C . . .<br>
19 29067507 . C T . . .<br>
9 37537480 . C T . . .<br>
15 73792647 . C T . . .<br>
6 83262445 . A G . . .<br>
6 108505905 . T C . . .<br>
6 115968860 . G A . . .<br>
6 118413764 . A C . . .<br>
6 130062085 . G T . . .<br>
6 130185532 . C G . . .<br>
1 146831660 . G A . . .<br>
6 146861758 . T C . . .<br>
<br>
file coor. assem. 37;<br>
<br>
1 14221605 . T C .<br>
1 148678790 . G A .<br>
6 83212439 . A G .<br>
6 108455899 . T C .<br>
6 115918878 . G A .<br>
6 118363782 . A C .<br>
6 130012103 . G T .<br>
6 130135550 . C G .<br>
6 146810280 . T C .<br>
9 37345065 . C T .<br>
15 73623077 . C T .<br>
19 29141997 . C T .<br>
<br>
script:<br>
        perl /opt/gridware/pkg/apps/ensemblvep/73/linux-x86_64/bin/<a href="http://variant_effect_predictor.pl" target="_blank">variant_effect_predictor.pl</a> \<br>
         -i /groups/mnt1/molecularoncology/vcfs/test/1906.snp.cand.snvs.pass.thresh.vcf.38 \<br>
         -o /groups/mnt1/molecularoncology/vcfs/test/1906.snp.cand.snvs.pass.thresh.vep.38 \<br>
         --offline \<br>
         --species mus_musculus \<br>
         --sift s \<br>
         --polyphen s \<br>
         --regulatory \<br>
         --symbol \<br>
         --domains  \<br>
         --ccds \<br>
         --gmaf \<br>
         --check_existing \<br>
         --check_alleles \<br>
         --no_progress \<br>
         --verbose \<br>
         --cache \<br>
         --dir /groups/mnt1/molecularoncology/mks/VEPcacheAll/VEPcacheMM.73<br>
<br>
Output:<br>
<br>
#----------------------------------#<br>
# ENSEMBL VARIANT EFFECT PREDICTOR #<br>
#----------------------------------#<br>
<br>
version 73<br>
<br>
By Will McLaren (<a href="mailto:wm2@ebi.ac.uk">wm2@ebi.ac.uk</a>)<br>
<br>
Configuration options:<br>
<br>
cache             1<br>
ccds              1<br>
check_alleles     1<br>
check_existing    1<br>
core_type         core<br>
dir               /groups/mnt1/molecularoncology/mks/VEPcacheAll/VEPcacheMM.73<br>
dir_plugins       /groups/mnt1/molecularoncology/mks/VEPcacheAll/VEPcacheMM.73/Plugins<br>
domains           1<br>
gmaf              1<br>
host              <a href="http://ensembldb.ensembl.org" target="_blank">ensembldb.ensembl.org</a><br>
input_file        /groups/mnt1/molecularoncology/vcfs/test/1906.snp.cand.snvs.pass.thresh.vcf.38<br>
no_progress       1<br>
offline           1<br>
output_file       /groups/mnt1/molecularoncology/vcfs/test/1906.snp.cand.snvs.pass.thresh.vep.38<br>
polyphen          s<br>
port              5306<br>
regulatory        1<br>
sift              s<br>
species           mus_musculus<br>
stats             HASH(0x1bdfb68)<br>
symbol            1<br>
verbose           1<br>
<br>
--------------------<br>
<br>
2014-03-03 12:25:03 - Read existing cache info<br>
2014-03-03 12:25:03 - INFO: Database will be accessed when using --polyphen; consider using the complete cache containing polyphen data (see documentation for details)<br>
2014-03-03 12:25:03 - Starting...<br>
2014-03-03 12:25:03 - Detected format of input file as vcf<br>
2014-03-03 12:25:03 - Read 12 variants into buffer<br>
2014-03-03 12:25:03 - Reading transcript data from cache and/or database<br>
2014-03-03 12:25:04 - Retrieved 538 transcripts (0 mem, 538 cached, 0 DB, 0 duplicates)<br>
2014-03-03 12:25:04 - Reading regulatory data from cache and/or database<br>
2014-03-03 12:25:04 - Retrieved 2068 regulatory features (0 mem, 2068 cached, 0 DB, 0 duplicates)<br>
2014-03-03 12:25:04 - Checking for existing variations<br>
2014-03-03 12:25:11 - Analyzing chromosome 1<br>
2014-03-03 12:25:11 - Analyzing variants<br>
2014-03-03 12:25:11 - Analyzing RegulatoryFeatures<br>
2014-03-03 12:25:11 - Analyzing MotifFeatures<br>
2014-03-03 12:25:11 - Calculating consequences<br>
Can't call method "db" on unblessed reference at /opt/gridware/pkg/apps/ensemblvep/73/linux-x86_64/perl/lib/perl5/Bio/EnsEMBL/Variation/TranscriptVariation.pm line 313.<br>
<br>
________________________________<br>
<br>
This email is confidential and intended solely for the use of the person(s) ('the intended recipient') to whom it was addressed. Any views or opinions presented are solely those of the author and do not necessarily represent those of the Cancer Research UK Manchester Institute or the University of Manchester. It may contain information that is privileged & confidential within the meaning of applicable law. Accordingly any dissemination, distribution, copying, or other use of this message, or any of its contents, by any person other than the intended recipient may constitute a breach of civil or criminal law and is strictly prohibited. If you are NOT the intended recipient please contact the sender and dispose of this e-mail as soon as possible.<br>

<br>
_______________________________________________<br>
Dev mailing list    <a href="mailto:Dev@ensembl.org">Dev@ensembl.org</a><br>
Posting guidelines and subscribe/unsubscribe info: <a href="http://lists.ensembl.org/mailman/listinfo/dev" target="_blank">http://lists.ensembl.org/mailman/listinfo/dev</a><br>
Ensembl Blog: <a href="http://www.ensembl.info/" target="_blank">http://www.ensembl.info/</a><br>
</blockquote></div><br></div>